按这个流程操作人血小板抗体elisa试剂盒准没错

　　人血小板抗体elisa试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人抗血小板抗体捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗血小板抗体呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

 

　　人血小板抗体elisa试剂盒的操作流程：

　　1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

　　3、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

　　4、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。

　　6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

　　它使用注意事项：

　　1、检测前，检查各种仪器，打开酶标仪，稳定20分钟左右。

　　2、检测样本要澄清，不能含杂物，否则会直接影响结果。

　　3、实验开始前要将试剂盒取出，室温放置30-40分钟，使各种试剂都恢复到室温，以使检测结果更为稳定。

　　4、尽量做双标准实验，这样可以保证数据的准确性。

　　5、底物具有毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，要避免接触。

　　10、实验中，要使底物避光保存，酶标板均可拆卸，多余的部分应密封好，低温保存。