小鼠磷酸化的核转录因子(pNF-KB)elisa试剂盒

小鼠磷酸化的核转录因子(pNF-KB)elisa试剂盒
品牌：白益
英文名称：MousePhosphorylatedNF-KBelisakit
货号：BY-P9S2719X
检测范围：31.25-1000pg/ml

试剂盒组成	48孔配置	96孔配置	保存
说明书	1份	1	R.T.
封板膜	2片（48）	2片（96）	R.T.
密封袋	1个	1个	R.T.
酶标包被板	1*48	1*96	2-8℃保存
标准品：27ng/ml	0.5ml*1瓶	0.5ml*1瓶	2-8℃保存
标准品稀释液	1.5ml*1瓶	1.5ml*1瓶	2-8℃保存
酶标试剂	3ml*1瓶	6ml*1瓶	2-8℃保存
样品稀释液	3ml*1瓶	6ml*1瓶	2-8℃保存
显色剂A液	3ml*1瓶	6ml*1瓶	2-8℃保存
显色剂B液	3ml*1瓶	6ml*1瓶	2-8℃保存
终止液	3ml*1瓶	6ml*1瓶	2-8℃保存
浓缩洗涤液	（ 20ml*20倍）*1瓶	（20ml*30倍）*1 瓶	2-8℃保存

操作流程：
 (1)产品仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。

(2)酶标板置4℃,包被过夜。

(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

(6)洗板,同(4)。

(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。

(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

(9)洗板,同(4)。

(10)每孔加TMB显色液100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

(12)分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

小鼠磷酸化的核转录因子(pNF-KB)elisa试剂盒的使用常识：
（1）试剂切忌与手接触（有些试剂有强腐蚀性、等特性）。
（2）要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，绝不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，才可取用另一种试剂。
（3）试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后请及时将瓶放回原处，以免遗忘，带来不便。
（4）已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内（怕产生原试剂的再次污染）。?

 

免责声明：
1.   试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.   严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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