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沙门氏菌荧光定量PCR检测试剂盒

更新时间:2022-07-21

简要描述:

沙门氏菌荧光定量PCR检测试剂盒
沙门氏菌(Salmonella)引起的中毒病例在世界各地的食物中毒病例中所占数量比例非常高。本试剂盒就是针对沙门氏菌肠毒素 stn 基因设计特异性引物,利用实时荧光定量 PCR 技术开发的沙门氏菌检测试剂盒,它通过荧光染料实时显示样品模板 DNA 的量,并通过坐标曲线表示出来,结果直观准确。

型号:点击量:82

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沙门氏菌荧光定量PCR检测试剂盒

具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
2. 荧光定量 PCR 检测,反应特异性强。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
规格及成分 成分 编号 50 次塑料袋包装
2×qPCR Mix 90408 1.0 mL
stn 专一性引物对 yw13891390 200 μL
stn 阳性对照,
XXX 10E9 拷贝/μL
yw13911392 100 μL
超纯水 100935 1 mL
使用手册 1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂 样品等
使用方法 一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的
关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检
测灵敏度。

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二、制备 stn 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓
度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本
试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供
活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳
性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到
10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7
拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震
荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5
拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6
个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个
样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,
并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

三、数据处理

 以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品

的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值,再推算出其浓度。


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